Чотири основні методи мікробного аналізу включають вимірювання росту, мікробний підрахунок, фізіологічний індекс і мікроскопію мазка.
Вимірювання зростання
Вимірювання об’єму: стан росту мікроорганізмів відображається шляхом вимірювання кількості гіф у певному об’ємі культурального середовища. Цей спосіб простий і швидкий, але похибка велика.
Метод сухої ваги: Суху вагу мікроорганізмів визначають центрифугуванням або фільтруванням. Цей спосіб більш громіздкий і зазвичай використовується, коли мікробним продуктом є бактеріальна клітина, наприклад сухі дріжджі, корм тощо.
Турбідиметрія: значення абсорбції на певній довжині хвилі вимірюється ультрафіолетовим спектрофотометром для визначення стану росту мікроорганізмів. Цей метод в основному використовується для моніторингу росту бактерій у бродильній промисловості.
Вимірювання довжини міцелію: для нитчастих грибів і деяких актиноміцетів довжину росту гіф протягом певного періоду часу можна виміряти на культуральному середовищі.
Метод мікробного підрахунку
Метод гемоцитометра: простий, інтуїтивно зрозумілий і швидкий, але підходить лише для підрахунку спор, вироблених одноклітинними мікроорганізмами або ниткоподібними мікроорганізмами, і результати включають мертві та живі бактерії23.
Метод підрахунку фарбування: використовуйте такі барвники, як нейтральний червоний, трипановий синій і метиловий синій, щоб відрізнити мертві клітини від живих.
Метод розведення рідини: виконайте десятикратне послідовне розведення невідомого бактеріального зразка, запишіть кількість пробірок із ростом при кожному розведенні після посіву, а потім розрахуйте вміст живих бактерій на основі кратного розведення зразка. Цей спосіб більш громіздкий, але кількість живих бактерій можна підрахувати.
Метод підрахунку колоній на планшеті: Розподіліть розведений бактеріальний розчин на тверде культуральне середовище та обчисліть кількість бактерій у вихідному бактеріальному розчині після культивування. Цей метод дозволяє отримати інформацію про живі бактерії, але операція є громіздкою та потребує певного часу посіву.
Фізіологічний індикаторний метод
Визначення вмісту азоту: Вміст азоту більшості бактерій становить 12,5% сухої маси. Стан росту мікроорганізмів можна опосередковано відобразити шляхом вимірювання вмісту азоту.
Визначення вмісту вуглецю: Використовуйте розчин K2Cr2O7, щоб виміряти абсорбцію на певній довжині хвилі, намалюйте стандартну криву, щоб обчислити кількість росту.
Метод визначення відновлюючого цукру: відображення стану росту мікроорганізмів шляхом вимірювання кількості відновлюючого цукру, який часто використовується у великомасштабному промисловому виробництві бродіння.
Визначення інших фізіологічних речовин: включаючи нуклеїнову кислоту, АТФ та інші показники, а також кислотоутворення, газоутворення, споживання кисню, теплоутворення та інші показники.
Мікроскопія мазка
Мікроскопія мазка - це метод дослідження бактерій, цитології, ферментних бактерій, мікрофілярій і кристалів холестерину. Готуючи мазки та спостерігаючи їх під мікроскопом, можна інтуїтивно зрозуміти морфологію та структуру мікроорганізмів
